Sistema de detección iVision™ IHC

Nombre del producto

iVision ^TM Poly-HRP Cabra anti-ratón, conejo IgG 

Especificación de embalaje

Uso previsto

Solo para uso de investigación. iVision ^TM Goat anti-Mouse, Rabbit IgG, conjugado con peroxidasa diseñado para la detección cromogénica de antígenos específicos que han reaccionado con un anticuerpo primario suministrado por el usuario en tejido humano. Se recomienda que los reactivos no se sustituyan entre kits o números de lote. 

Características de rendimiento _ 

Se ha descubierto que los sistemas de detección son sensibles y muestran una unión específica al anticuerpo primario con una unión mínima o no específica. Los sistemas de detección iVision ^TM han demostrado ser reproducibles y consistentes dentro de una sola ejecución, entre ejecuciones y entre lotes. Se ha determinado que los productos son estables durante los períodos especificados por pruebas en tiempo real. 

principio _

Los antígenos en tejidos y células se detectan en inmunohistoquímica (IHC) mediante un proceso de dos etapas: la unión de un anticuerpo primario y la posterior detección de esta unión mediante el sistema de detección iVision ^TM . Los tejidos se seccionan y se montan en un portaobjetos. A continuación, se aplica el anticuerpo primario producido en el ratón para que reaccione con los antígenos específicos, seguido de la aplicación de Poly-HRP Goat anti-Mouse, Rabbit IgG para que reaccione con los anticuerpos primarios y, finalmente, una solución de sustrato/cromógeno, como DAB o AEC, que es convertido por la peroxidasa en un depósito insoluble. Todo el procedimiento genera un perfil visible de ubicaciones de antígenos en secciones de tejido o en tipos de células. 

Componentes principales

Cabra anti-ratón, conejo IgG, conjugado con peroxidasa

Almacenamiento

Almacenar a 2～8℃  durante 18  meses .

Ejemplo de requisitos

Los tejidos FFPE generalmente se cortan en secciones tan delgadas como 3 ～5 μ m con un micrótomo.  Estas secciones luego se montan en portaobjetos de vidrio que se recubren con un adhesivo tisular.

Protocolo

1.  Preparación de la muestra : Desparafinar los portaobjetos en xileno Ⅰ , Ⅱ , Ⅲ durante  5 minutos ; Transferir los portaobjetos una vez a través de alcoholes al 100 %, 100 %, 95 % y 75 %  durante 2 minutos respectivamente  . Enjuague los portaobjetos con agua desionizada durante 30 segundos.

2 . Bloqueo : bloquee la actividad de la peroxidasa endógena incubando las secciones en  una solución  de H ₂ O _{2 al 3 %} a temperatura ambiente durante 5 minutos para  bloquear la actividad de la peroxidasa endógena. Enjuague los portaobjetos con agua desionizada durante 30 segundos.

3 . Recuperación de antígeno : Calentar el tampón de recuperación de antígeno EDTA a 100 ℃ . Luego coloque los portaobjetos en el tampón hervido y continúe calentando durante 15 ～20 min. Enfríe naturalmente durante 30 minutos. Enjuague la muestra con tampón de lavado.

4 . Incubación de anticuerpos primarios: Drene los portaobjetos. Agregue el anticuerpo primario al tejido , incube a temperatura ambiente durante  30 minutos . (usar diluyente de anticuerpos o PBS como control) . Lave los portaobjetos en PBST 2 veces, 5 minutos cada vez. Si el anticuerpo primario está concentrado, dilúyalo a RTU (listo para usar) de acuerdo con la información del empaque . 

5.  Anticuerpo  secundario : Drene los portaobjetos. Agregue el anticuerpo  secundario iVision ^TM  Poly-HRP Goat anti-Mouse, Rabbit IgG al tejido e incube a temperatura ambiente durante 20 minutos . Lave los portaobjetos en PBST 2 veces, 5 minutos cada vez . 

6. DAB : Drene los portaobjetos. Añadir DAB  al tejido e incubar a temperatura ambiente durante 5 min. Enjuague los portaobjetos con agua desionizada.

7. Tinción con hematoxilina : escurra los portaobjetos. Agregue hematoxilina al tejido e incube a temperatura ambiente durante 5 minutos . Enjuague los portaobjetos con agua. Utilice la solución ácida para la diferenciación . Enjuague los portaobjetos con agua.

8. Deshidratar : Deshidratar los portaobjetos en alcoholes al 75 % , 95 % y 100 %  durante 2 minutos . Seque los portaobjetos. Cubra el tejido teñido con un cubreobjetos usando un medio de montaje. 

R esultados esperados _ 

El uso adecuado de este reactivo dará como resultado una tinción clara e intensa en los sitios del antígeno tanto en la muestra como en el control positivo. Cualquier desviación de estos resultados esperados debe hacer que los usuarios cuestionen los resultados y consulten al servicio técnico o al distribuidor local para obtener ayuda.

Precauciones

1.  Lea atentamente las instrucciones y familiarícese con todos los componentes del kit antes de usarlo. Siga estrictamente las instrucciones durante la operación.

2.  NO use el kit ni ningún componente del kit después de su.

3.  Solo los profesionales capacitados pueden usar este kit. Utilice una bata de laboratorio adecuada y guantes desechables mientras manipula los reactivos.

4.  Evite el contacto de la piel, los ojos y las membranas mucosas con los productos químicos.

5.  NO pipetear con la boca.

6.  Los reactivos no utilizados, el kit usado y los residuos deben eliminarse de acuerdo con las normativas locales.

fabricante _

Nombre de la empresa: Xiamen Talent Biomedical Technology Co., Ltd

Dirección: Pisos n.º 3 y 4, edificio B10, n.º 2068 Wengjiao Road West, parque biomédico, distrito de Haicang, ciudad de Xiamen, 36100 China

Teléfono: +86 592 6315755            

Correo electrónico : tlsw@talentbiomedical.com                

Sitio web : www.talentbiomedical.com

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