Reactivo de anticuerpo CD45 para inmunohistoquímica

【Nombre del producto 】

Anticuerpo IHC -- CD45

【 Especificación de embalaje 】

【Uso previsto 】

Solo para uso de investigación. El reactivo CD45  Antibody  está diseñado para identificar cualitativamente CD45 mediante microscopía en secciones de tejido FFPE utilizando un sistema de detección inmunohistoquímico .

【P rincipio 】

CD45 ,  también conocido como antígeno común leucocitario (LCA) y T200. Es una tirosina fosfatasa expresada en la membrana plasmática de todas las células hematopoyéticas, excepto eritrocitos y plaquetas. CD45 es una molécula de señalización que regula una variedad de procesos celulares que incluyen el crecimiento celular, la diferenciación, el ciclo celular y la transformación oncogénica. Añada el anticuerpo primario para unir el antígeno en las secciones de tejido y, a continuación, utilice el anticuerpo primario de unión del anticuerpo secundario marcado con HRP para formar el complejo anticuerpo secundario - anticuerpo primario - antígeno .   Cuando se agrega la solución cromogénica DAB, la HRP reacciona con el sustrato enzimático para producir un producto de reacción insoluble de color marrón, lo que indica indirectamente la existencia del antígeno. 

【Componentes principales 】

Inmunoglobulina , diluyente de anticuerpos

【Almacenamiento 】

Conservar a 2～8℃  durante 18  meses 。

【Requisitos de la muestra 】

Los tejidos FFPE generalmente se cortan en secciones tan delgadas como 3 ～5 μ m con un micrótomo.  Estas secciones luego se montan en portaobjetos de vidrio que se recubren con un adhesivo tisular.

【Protocolo 】

1.  Preparación de la muestra : Desparafinar los portaobjetos en xileno Ⅰ , Ⅱ , Ⅲ durante  5 minutos ; Transferir los portaobjetos una vez a través de alcoholes al 100 %, 100 %, 95 % y 75 %  durante 2 minutos, respectivamente  . Enjuague los portaobjetos con agua desionizada durante 30 segundos.

2 . Bloqueo : bloquee la actividad de la peroxidasa endógena incubando las secciones en  una solución  de H ₂ O _{2 al 3 %} a temperatura ambiente durante 5 minutos para  bloquear la actividad de la peroxidasa endógena. Enjuague los portaobjetos con agua desionizada durante 30 segundos.

3 . Recuperación de antígeno : Calentar el tampón de recuperación de antígeno EDTA a 100 ℃ . Luego coloque los portaobjetos en el tampón hervido y continúe calentando durante 15 ～20 min. Enfríe naturalmente durante 30 minutos. Enjuague la muestra con tampón de lavado.

4 . Incubación de anticuerpos primarios: Drene los portaobjetos. Agregue el anticuerpo primario al tejido , incube a temperatura ambiente durante  30 minutos . (usar diluyente de anticuerpos o PBS como control) . Lave los portaobjetos en PBST 2 veces, 5 minutos cada vez. Si el anticuerpo primario está concentrado, dilúyalo a RTU (listo para usar) de acuerdo con la información del empaque . 

5.  Anticuerpo  secundario : Drene los portaobjetos. Agregue el anticuerpo secundario al  tejido e incube a temperatura ambiente durante  20 minutos . Lave los portaobjetos en PBST 2 veces, 5 minutos cada vez .

6. DAB : Drene los portaobjetos. Añadir DAB  al tejido e incubar a temperatura ambiente durante 5 min. Enjuague los portaobjetos con agua desionizada.

7. Tinción con hematoxilina : escurra los portaobjetos. Agregue hematoxilina al tejido e incube a temperatura ambiente durante 5 minutos . Enjuague los portaobjetos con agua. Use la solución ácida para la diferenciación . Enjuague los portaobjetos con agua.

8. Deshidratar : Deshidratar los portaobjetos en alcoholes al 75 % , 95 % y 100 %  durante 2 minutos . Seque los portaobjetos. Cubra el tejido teñido con un cubreobjetos usando un medio de montaje. 

【Localización positiva 】

1.  Localización positiva :  membrana .

2.  Control positivo :  amígdala .

【Precauciones 】

1.  Lea atentamente las instrucciones y familiarícese con todos los componentes del kit antes de usarlo. Siga estrictamente las instrucciones durante la operación.

2.  NO use el kit ni ningún componente del kit después de su.

3.  Solo los profesionales capacitados pueden usar este kit. Utilice una bata de laboratorio adecuada y guantes desechables mientras manipula los reactivos.

4.  Evite el contacto de la piel, los ojos y las membranas mucosas con los productos químicos.

5.  NO pipetear con la boca.

6.  Los reactivos no utilizados, el kit usado y los residuos deben eliminarse de acuerdo con las normativas locales.

【Fabricante 】_

Nombre de la empresa: Xiamen Talent Biomedical Technology Co., Ltd

Dirección: Pisos n.º 3 y 4, edificio B10, n.º 2068 Wengjiao Road West, parque biomédico, distrito de Haicang, ciudad de Xiamen, 36100 China

Teléfono: +86 592 6315755            

Correo electrónico : tlsw@talentbiomedical.com                

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【 Símbolos 】